外泌體，作為細(xì)胞間通信的關(guān)鍵信使，其在疾病診斷、藥物遞送和再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。然而，如何從復(fù)雜的生物樣本中高效、高純度地分離出外泌體，是后續(xù)所有功能研究與臨床應(yīng)用的首要挑戰(zhàn)和基石。不同的樣本類型、體積大小和研究目的，決定了分離技術(shù)的選擇策略。

一、常規(guī)樣本分離方案

超速離心法

原理：依據(jù)密度和粒徑差異進(jìn)行梯度離心。

特點(diǎn)：金標(biāo)準(zhǔn)，純度較高，但耗時(shí)較長。

超濾離心法

原理：通過濾膜截留外泌體。

特點(diǎn)：操作簡便，適合大體積樣本初步濃縮。

沉淀法

原理：使用聚合物（如PEG）沉淀外泌體。

特點(diǎn)：回收率高，但可能共沉淀雜質(zhì)。

二、小體積樣本分離方案

免疫磁珠法/親和磁珠法

原理：通過抗體結(jié)合外泌體表面標(biāo)志蛋白（如CD9、CD63）。

特點(diǎn)：高特異性，適合低濃度樣本。

尺寸排阻法

原理：基于粒徑大小在凝膠柱中分離。

特點(diǎn)：保留外泌體活性，適合功能實(shí)驗(yàn)。

膜親和柱法

原理：結(jié)合膜過濾與親和吸附。

特點(diǎn)：快速純化，適合微量樣本。

三、大體積樣本分離方案

切向流過濾

原理：連續(xù)過濾濃縮，保留目標(biāo)顆粒。

特點(diǎn)：適合規(guī)?；苽?，效率高

研究者選擇合適的技術(shù)方案，是解鎖外泌體生物學(xué)功能、推動(dòng)其從基礎(chǔ)科研走向臨床轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵第一步。

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